熒光共振能量轉移在蛋白質折疊研究
2020-09-04 09:35:16
“細胞在進行蛋白質折疊的時候會耍很多詭計。”伊利諾大學的研究員說。他們使用激光技術首次向眾人展示了細胞在蛋白質折疊過程的速度及穩定性上的調控是極大的。
Gruebele 教授說,這些受細胞環境影響的反應過程可能與阿爾茨海默氏癥,亨廷頓氏舞蹈癥,瘋牛病等相似,都是由于蛋白質的錯誤折疊或出現非正常的蛋白片段引起的。另一種可能,則與發燒時發生的一系列復雜的保護機制相關。
如圖中所示,黃色箭頭所指右邊為正確折疊的蛋白,黃色箭頭所指左邊是未折疊蛋白;蛋白中黃色的部分用紅色熒光受體及綠色熒光供體進行標記,以研究距離及蛋白質狀態。
在研究蛋白折疊過程是,他們使用藍色LED或氬離子激光器激發供體,應用熒光共振能量轉移原理,測得供體和受體之間的距離。
在顯微鏡下,這兩種熒光信號分別被分為紅色和綠色兩個通道,被CCD收集。試驗中,CCD的采集速度是一幀16.7毫秒,這是硬件的時間分辨率極限。研究者稱,如果使用更快的相機,那么采集一幀圖像的時間可降低到微秒級。
通過體內及體外實驗對比,研究者發現者兩種狀況下的折疊速度是不一樣的。這種差別可能是由于體內的狀態比較擁擠,而試管環境中的蛋白折疊時沒有壓力。
研究者提到他們的*終目標是在細胞及化學水平上研究溫度對細胞行為等的影響。