奧林巴斯顯微鏡光路梯度和強度分布
在經歷了由正交波前穿過在微分干涉對比(DIC)顯微鏡標本的光路差由光學系統轉換為振幅的變化在目鏡觀察到的*終圖像。這種互動式的教程探討了各種半透明的標本光路梯度和幅度(強度)型材之間的關系。
教程初始化與一個隨機選擇的標本圖像顯示在左側的窗口,以及一對對角線藍線以45度角慢慢遍歷圖像的檢體部分。諾馬斯基棱鏡在微分干涉顯微鏡的剪切軸(x)由雙頭白色箭頭位于檢體圖像窗口(的下角所示注:在顯微鏡的剪切軸線平行于所述對角線)。作為對角線藍線跨越圖像行進,對應于該兩個藍色線之間的薄角切片試樣的振幅信息標在DIC振幅資料窗口。此外,光程差(OPD)沿對角線切片呈現在光程差窗口。(奧林巴斯顯微鏡)
以手動操作教程,先點擊暫停按鈕來停止雙藍線的議案。接下來,放置在線路的鼠標光標,然后點擊并拖動線跨越圖像在沿著試件表面的任何切片,以查看振幅型材和光程差的變化。以這種方式,不同的振幅信息和關系到相應的光程差,可以檢測和比較,在對試樣和周圍背景的每個點。經過一個標本已被徹底研究,使用選擇一個樣本下拉菜單中選擇具有不同的配置文件的新標本。該Applet速度滑塊可以用于改變在其中藍色對角線自動遍歷試樣圖像的速度。
之后,由分束棱鏡產生正交波前穿過標本相梯度,它們是通過微分干涉由第二棱鏡和分析器(另一個偏振片)重組,得到梯度的高對比度的再現。兩個微分干涉對比,相位相反的依靠取樣光束和參考光束之間樣品的相位差的基礎上變化的幅度,以產生一個圖像。相襯轉換從通過檢體和參考光束穿過聚光鏡纖維環,試樣,并且相板衍射光波之間呈現的相位變化圖像振幅信息。在區別,然而,DIC圖像對應從試樣的光程差所得的梯度分布到數學*衍生物,而不是幅度。
光路梯度和在DIC顯微鏡強度分布之間的關系示于圖1中。圖1中呈現的樣品(a)是一個環形人紅血球與由雙指示的剪切軸微分干涉相襯成像的高倍率-headed箭頭(西北向東南)。光程差(縱軸)與紅細胞的沿剪切軸(橫坐標)的橫截面的曲線圖顯示在圖1(b)中。請注意,光路配置文件反映薄中心厚邊人類血細胞展出。橫跨微分干涉反差圖像的強度掃描,這非常接近地對應于所述光學路徑差曲線的*導數(圖1(b))時加入到一個常數,是在圖1(c)中。在紅細胞光學路徑剖面正和負斜坡產生較高和較低的振幅,分別在一階導數的掃描和相應的微分干涉對比圖像的區域。表現出在斜率不變化的光程差分布的區域具有相同的強度為背景和對應于光程差的一階導數曲線的基線。