尼康顯微鏡的熒光激發塊
在這里我們展示如何激發塊選擇的平場免疫熒光顯微鏡可以擴展他們的能力。
平場免疫熒光顯微鏡是什么
熒光團
熒光現象發生時由一種物質，當它釋放能量，當它從興奮狀態返回到其基態時就會發出亮光吸收特定波長的光 （勵磁光）。許多熒光物質 （稱為熒光團） 已經有不同的用途，與激發波長從紫外到紅外。然而，發射波長通常比的長的激發能量，使得它們的波長。
平場免疫熒光顯微鏡
平場免疫熒光顯微鏡中的激發塊中的作用
勵磁激發塊 （EX）
二色鏡 （DM）
屏障激發塊 （BA） 或排放 （EM） 的激發塊
尼康的噪音終結者
選擇熒光激發塊和鏡
選擇熒光激發塊和鏡子時，應遵循以下步驟。
（熒光物質） 熒光波長
確定在使用熒光的波長。此信息指出在目錄里，但熒光的波長特性也略有改變不同鹽度、 ph 值和胞內條件等的可解條件。因此，我們建議用熒光計測量勵磁和熒光波長。然后，使用此信息來選擇*適當的光學元件。
二色鏡的選擇
障礙激發塊選擇
選擇一個激發塊，允許熒光波長從傳遞的標本。通常情況下，長時間傳輸波長長的通激發塊都是選擇帶通激發塊。然而，是不會傳染這些波長較長的帶通激發塊是經常用作屏障激發塊從一個多重染色標本中分離的波長或使用相機對較長的波長敏感時。
勵磁激發塊選擇
組合的屏障激發塊和勵磁激發塊
障礙激發塊和激發塊勵磁的**結合是一個可以讓沒有光通結合時。發射的熒光是很弱，所以通過激發塊泄漏任何光線會降低圖像質量。
獲得明亮的熒光圖像
有時它被建議刪除 ND激發塊在勵磁光學和增加激發光源的強度。然而，增加激發光源的強度將會快速漂白熒光基團，損害的標本，以及日益增加的自體熒光 （注 2） 的單元格中。基于這些原因，光源應保持盡可能弱和觀察光學作出盡可能高效在撿的熒光信號 （通過擴大物鏡的孔徑，增加波段內熒光濾光片，使用更加靈敏的照相機等)。。
[注 1]斯托克城的轉變是指激發能量和熒光能量所產生的能量部分損失作為熱作為電子落回從興奮狀態中熒光材料其基態之間的能量差。（從巖波書店書店的物理和化學詞典)
[注 2]自體熒光是指在非那些通常被定義為熒光物質的熒光物質的存在。例如，單元組件 （如 NAADPH 或核黃素給掉在短波長范圍內 （紫外和可見） 在不染色細胞相對較強的熒光。
還原漂白工藝
你可以采取以下步驟，以減少漂白。
使用抗漂白的代理
P-苯二胺抗漂白劑可以用于 FITC 和 n-丙基 gallete 可以用于羅丹明。
使用 ND 濾鏡
使用中性密度或 ND 濾鏡上顯微鏡以減少光的水平到*起碼的觀察。有時這可能需要設置的篩選到 100%，同時考慮不分割的光路步驟盡可能多。
使用漂白耐熒光
為每個測試的目的使用可用的*耐漂白劑熒光。