奧林巴斯顯微鏡斜照明折光指數測定
斜照明有時用作貝克線測試以確定是否高于或低于周圍的介質折射率的一個標本的替代方法。本互動教程將探討如何標本和其周圍介質的折射率的變化改變在顯微鏡下可見性時利用斜照明技術。
本教程使用初始化一個標本的折射率的 1.15 定位在周圍的介質中的折射率 1.33 (代表水或輕輕地緩沖鹽水溶液),和被照亮的離軸光線來自左下方的教程窗口。為了運行本教程中,移動的標本(折射率值) 滑塊值為 1.0 和 1.5 之間。從右到左移動滑塊時,試樣的外觀被改變在目鏡視圖窗口中。要改變周圍介質的折射率,環繞(折射率值) 滑塊移動向右或向左 (此滑塊也有一系列的折射指數 1.0 和 1.5 之間)。翻譯環繞滑塊也會影響試樣的外觀和可見性,如下文所述。兩個滑塊的互動和一個滑塊的定位會影響到的其他的運動范圍。
在試樣較低折射率的介質中的裝載位置的情況下,底紋從 anaxial 照明,結果將出現在方相反的光進入標本,反之亦然,如圖 1 所示。在圖 1 中給出了兩個圖表中,兩個同等大小斜光線都被描繪進入通過周圍的介質在同一入射角的標本。A在左邊圖上,光傳播試樣面積較大,比在點B的點,這樣,附近的地區上的點A試樣將出現比在B點附近的區域更暗。在這些情況下試樣的一側會出現陰影或比另一側通過顯微鏡目鏡查看時有點暗 (點表示的A'和B'在圖 1 的左上部)。這是介質的案例,當樣品折射率大于周圍。
當試樣具有較低的折射率比周圍的介質時發生了相反的效果 (見圖 1 的右側)。在這種情況下,試樣的陰影或較暗一側將是最斜光部門停止的那一方。當試樣和周圍介質有完全相同的折射率時,標本將是透明的 (或不可見的) 然后會有對斜照明沒有折射的影響。
該折射率測定技術的靈敏度是高度依賴于聚光鏡焦距,可變光闌的位置,和扇區的幾何停止(如果使用的話)。一般情況下,當聚光鏡用心專注,甚至在照明領域內的實現得到最好的結果。