透射光顯微鏡科勒照明的調整是應該實行，直至顯微鏡的所有嚴肅的學生掌握了邏輯和相對容易的過程。 在顯微鏡被接通每次，應該仔細檢查，以確保所有的光學元件的正確對準，并保證在燈的中心與所述聚光鏡和視場光闌被正確調整為科勒照明。

在圖1所示的顯微鏡采用了*的外部光源提供照明的顯微鏡。 燈殼體包含一個視場光闌和聚光透鏡，除了鎢 - 鹵素燈泡。 一個單獨的電壓調節器提供可調節的直流電壓源，該5和12伏之間變化的燈。 現代顯微鏡通常包含內置到顯微鏡的基礎上，沿與會聚透鏡和視場光闌的光源。 顯微鏡用內部或外部光源科勒照明調整在理論上是相似的，但也有在下面將要描述的過程的某些差異。

在顯微鏡下，無論是對于克勒Nelsonian，或任何其它策略用于照明的對準的一個重要步驟，是在光源（通常是鎢 - 鹵素燈泡）的對準。 許多現代顯微鏡現在有預中心和預聚焦燈，但是老款車型仍然需要光源為中心，重點用戶。 我們建議您咨詢的車主手冊中的說明有關如何燈為中心，并為其他有關照明光源的重要信息。 下面的程序建議對齊外部和內部的燈：

內部鹵鎢燈

• 后在顯微鏡上，完全打開兩個視場光闌（通常接近顯微鏡的光端口）和聚光鏡孔徑光闌（由套環控制或處理上的聚光器殼體）的燈開關。

• 有些廠家為擴散光從燈泡發出提供一個磨砂玻璃過濾器。 這個過濾器通常位于鄰近所述燈殼在那里它被安裝在顯微鏡的主體中的過濾器保持器。 在進行燈對準前除去此過濾條件。

• 放置一個片的白紙，磨砂玻璃，劍擦拭，或鏡頭清潔紙顯微鏡端口和燈絲的圖像將如圖2清晰可見。

• 使用在燈殼體上的調節螺釘旋轉燈（因此，長絲）在其保持器也進行移動前后或上下移動。 我們已經構建了一個互動的Java教程的評論燈絲定位的基礎知識。 正確地操縱燈殼體調整的組合應確保燈絲是集中在光路徑和聚焦的聚光鏡的孔徑光闌。

圖3示出了當燈絲采用上面描述的程序是可見的顯微鏡光端口的典型視圖。 在左側圖3中的端口（a）包含細絲是嚴重失準和位置不正確聚焦，將完全填充孔徑光闌物鏡的，也不是后焦平面的圖像。 使用在燈殼體平移調整，燈絲被聚焦（圖3（b）），然后將光口內的中心（圖3（c））。 游客和學生可以練習使用對準下面的交互式Java教程“虛擬”燈絲：

外部鎢及鎢鹵素燈泡

• 大多數外部光源是老年人和沒有預先為中心的燈泡。 在定心外部鎢 - 鹵素燈的*個步驟是預測燈絲的圖象復印在一個遙遠的片材，由一本書或壁支承。 使用調整螺釘或旋鈕繞其自身軸線的長絲，并確保它被聚光透鏡和視場光闌，它們是外部照明源的一個組成部分的光軸的中心。

• 放置在外部照射約7-10英寸的距離反射鏡位于該顯微鏡的基座直接下方的聚光器上（參見圖1）。許多關于設計用于外部光源的顯微鏡鏡是平凹并具有一個平面（平面）和一個凹邊。 肯定的是，光源是從所述反射鏡的平坦表面使用外部鎢鹵素光源時反射。



• 燈絲應在鏡子為中心，如圖所示4。 這可以以類似于內部燈的方式通過將一塊紙巾在鏡子和可視化，其中長絲圖像投影進行檢查。 進行任何必要的調整，以使外部照明與顯微鏡的光學軸線。 定心燈絲后，反射鏡的位置應以投影反射到聚光器。 通過將一塊紙巾在載物臺開幕檢查。 燈絲應該是失焦，但在載物臺開口的中心方形框。

聚光鏡和視場光闌的對齊方式

• 旋轉物鏡轉換器帶來10倍的物鏡入光路。 下一步，將標本在顯微鏡載物臺上，并使用了粗，細調焦旋鈕聚焦顯微鏡。 這應該是通過緩慢升高顯微鏡載物臺，同時觀看滑動，直到它非常接近完成（但不接觸！）的物鏡。 在這一點上，本階段將要稍微降低 ，使樣品聚焦。 這是，當正確實施，將避免物鏡和標本蓋玻片之間的沖突的一個重要概念。 看看通過目鏡觀察，慢慢地降低載物臺，用細調焦旋鈕，直到試片細節成為焦點。 試樣應具備足夠的對比度，提供清晰，明快的圖像。 一個高度染色生物組織樣品是優良的用于明場模式對準顯微鏡，但光學雙折射的樣品也可用于當在顯微鏡配備為偏振光或微分干涉對比。

• 雙目顯微鏡，調整眼管與您的瞳距一致。 單一的融合圖像應通過兩只眼睛是不可見的頭部顯著運動，觀看應該是舒適。 如果只有一個人使用的顯微鏡，這種調整不應該要經常做。 許多望遠鏡頭具有分級量表（圖5），對應于瞳孔間距離的大小，使顯微鏡來快速調整眼管不查看通過它們（平均瞳孔間距為65毫米）。



• 在現代顯微鏡，眼管類似雙筒望遠鏡的方式進行調整。 然而，在許多老機型，眼管來回滑動在一個單一的平面，并調整它們可能涉及輕微改變顯微鏡鏡筒長度。 不管翻譯機制，管子應該被定位在一個距離，該距離能舒適地觀看。 接著，旋轉包含畢業規則或顯微攝影，直到分劃板標記出現在大家關注的焦點疊加在一個集中的標本目鏡的眼球晶狀體。 如果沒有標線存在，轉動眼球晶狀體，直到樣本的焦點。

• 屈光度調節應單獨向目鏡。 一些顯微鏡對每個目鏡分級刻度，指示相對于所述目鏡的主體的眼透鏡的位置。 其它模型保持目鏡的身體在一個固定的位置牢固地固定在眼管子的銷和槽。 *步是要么排隊上裝備有這種標記的目鏡分級標記或轉動眼透鏡順時針*短焦距位置。 接著，集中樣品與10倍的物鏡，然后旋轉物鏡轉換直到下一個放大倍數的物鏡（通常為5倍）為試樣的上方。 在這一點上，單獨重新調整每只眼睛晶狀體（不使用顯微鏡粗或細的重點機制），直到試樣是在大家關注的焦點。 旋轉20倍物鏡移入光路和調整顯微鏡的微調旋鈕。 重復的眼睛屈光度調整鏡頭與5倍的物鏡（再次不擾民顯微鏡精細調焦機構），并在顯微鏡應調整到正確的屈光度設置。 這些設置會有所不同從用戶到用戶，所以記錄的眼透鏡的位置，如果目鏡有一個漸變的規模快速返回到適當的調整。

• 正確的屈光度調節允許在用戶的左眼和右眼的任何差額補償，使整個視場通過兩個目鏡出現在大家關注的焦點。 這也使顯微鏡通過在物鏡轉換器的所有不同的物鏡保持齊焦。 目鏡視度調節也可以彌補常見的視力問題，如遠或近近視，允許用戶查看樣本沒有眼鏡。 然而，這些目鏡調整不會彌補散光，強迫用戶有眼睛缺陷檢查標本時必須佩戴眼鏡。

• 接下來的一步是慢慢關閉視場光闌（調整可以是對外部燈殼體或在靠近光端口顯微鏡的基座）到它的*小設定值，直到只有一個模糊的輪廓示出了在視場（圖6（a ））。 臺下聚光器裝上（通常）控制的滾花旋鈕上下運動相對于載物臺，一個機架上。 調整此旋鈕，直至視場光闌葉片是大家關注的焦點，對已經為重點的試樣頂部，然后用聚光器螺絲，將視場光闌的圖像移動到視場中心（與光軸顯微鏡 - 圖6（b））。

• 當提升或降低聚光鏡聚焦視場光闌葉片，所述彈性膜片的聚焦圖像可以具有圍繞該葉片紅色或藍色的暈。 這是由于缺乏校正為在聚光鏡色差。 具有良好的校正聚光鏡將產生很少或沒有顏色膜片一個非常尖銳的輪廓。 視場光闌現在打開直到大約四分之三的視場中是可見的，聚光鏡，然后重新聚焦（圖6（c））。 檢查聚光鏡的對齊方式，必要時重新調整。 現在打開的視場光闌，直到它剛好*出視場（觀察），或在顯微攝影的情況下，剛好*出光罩標記定義捕獲膜的面積。 打開視場光闌任何更遠是不必要的，會導致過多的眩光和對比度損失。



• 下一個步驟是除去目鏡1和同行向下顯微鏡的管，如圖7（a）所示。 當你查看下管，打開和關閉聚光鏡孔徑光闌看到自己的形象在物鏡的后焦平面。 如果有內置到在顯微鏡底座上的光路中的磨砂玻璃漫射器濾波器，光的均勻發光的圓圈將是可見的。 如果沒有這樣的過濾器在光路中，你反而會看到燈絲的形象，在圖7（b）所示（以取代被刪除的目鏡，或勃氏鏡插入定心或相位望遠鏡將使這次調整更容易看到）。

• 這個動作的目的是設置孔徑光闌的大小，以*大化圖像的對比度，并獲得試樣的*佳圖像，而不會引入分辨率的損失，由于折射和衍射的工件。 一般的經驗法則是設置60和90％的整個光盤看出，在目鏡管的大小之間的孔徑光闌。

在一些情況下，部分封閉的孔徑光闌的邊緣不是同心的物鏡的照明系統后焦平面。 這是因為無論對臺下聚光器或物鏡的錯位，以及制造商的使用說明書應征詢正確的定心制度。 有些顯微鏡是在一個固定的中心位置那是不可能在實驗室中改變出廠時的孔徑光闌。 暗場和相襯聚光鏡通常總是將提供一個定心機構，由于這一步設立顯微鏡對這些照明方式的重要方面。 聚光鏡光圈應該用40倍或60倍的物鏡為中心，以避免重新中心的每一個物鏡（低倍率物鏡，將使用這種方法幾乎總是落在可以接受的邊界內）的隔膜。

現在，科勒照明已經建立了10倍的物鏡，就必須牢記的是，改變到一個更高的倍率物鏡將需要外地和孔徑光闌的重新調整。 例如，如果你切換到40倍的物鏡，你將不得不有點接近視場光闌和重新中心吧（看樣品的一個較小的區域）。 還有，聚光鏡孔徑光闌應稍微打開（在40×物鏡具有更高的數值孔徑比不10x物鏡）。 物鏡的每次改變，兩個隔膜，必須根據上面概述的步驟來調節。

科勒照明的條件并不在倍率使用較低倍率的物鏡（5倍以下）適用。 在準備低倍鏡，先對準顯微鏡，并使用10倍的物鏡調整光學通路進行適當的科勒照明。 大多數現代顯微鏡聚光鏡具有頂透鏡旋出光路的使用與5倍的放大倍率的物鏡和下方，如圖8中所示。 其他聚光鏡型號有*鏡頭，可以擰松或有聚光鏡的旋轉炮塔與低和高放大倍率的物鏡使用。

當旋開式透鏡從光路取出，聚光鏡的性能從根本上改變，并且孔徑光闌不再起作用，以控制照明光的數值孔徑。 為了避免漸暈，聚光鏡孔徑光闌應打開到其*寬的設定，標本對比度控制與視場光闌，它現在控制照明光的數值孔徑。

通過適當地調節顯微鏡科勒照明，樣品將被充分照射均勻，無眩光，提供良好的圖像分辨率和對比度。 欲了解更多信息，請咨詢我們的理論部分科勒照明和/或基礎知識顯微鏡照明 。 關于顯微鏡照明的參考材料，也可以在我們的發現參考書目并在部分網絡資源 ，其中包含指向其它顯微鏡的網站。