徠卡顯微鏡,谷物種子蛋白質運動
種子積累蛋白質和淀粉會被分解,并在發芽動員。 其中種子,谷物構成,構成高達80%的種子總體積的高度專業化的存儲組織的一個例子。種子內膜系統是高度專業化和種子貯藏蛋白穿過內膜系統旅行途中對蛋白質體,這是無論是從液泡起源的內質網(ER)或衍生。在大多數谷類醇溶蛋白是主要的類,它形成的ER衍生的蛋白質體貯藏蛋白。 然而,一些品種如小麥,燕麥或大麥同時包含醇溶蛋白和球蛋白的積聚在蛋白質貯藏液泡的變量值。
谷類種子儲存蛋白在穩定的環境中的天然能力已成功地利用,使用谷物作為用于生產藥物的興趣重組蛋白的平臺,出于這個原因,對于蛋白質的不同販賣路線的調查一直受到一些研究的,因為*終的儲存場地以及路由隨后的重組蛋白具有在*后的產量,例如產品的質量和產生影響。
利用熒光顯微鏡和電子顯微鏡與在不同的系統(單子葉植物和雙子葉植物)生產的重組糖蛋白聚糖結構的分析組合允許獲得一個更深入的了解的話題。 事實上,我們已經證明了蛋白質貯藏液泡玉米中的存在,我們已經證明,在蛋白質的谷物胚乳和雙子葉植物種子販運的關鍵差異。 因此,在谷物胚乳細胞蛋白質貯藏液泡是該進入內膜系統和不帶進一步瞄準信號的重組蛋白的*目的地。相同的蛋白質有效地分泌在雙子葉植物的種子像煙草或擬南芥,體現了很高的專業化谷物胚乳,不活過萌發和其*目的是蛋白質和淀粉的存儲一個垂死的組織
重組*植酸酶在玉米胚乳細胞中沉積
圖1顯示了在玉米胚乳細胞的重組*植酸酶的沉積。 重組*植酸酶攜帶的信號肽并沒有進一步的定位信號表達于玉米胚乳。 胚乳的切片對應于一個中間的發育階段被切斷用刀片和固定于4%多聚甲醛和0.5%戊二醛。
通過乙醇系列脫水后,將樣品滲透和嵌入LRWhite樹脂和塊被允許中聚合在60℃。 半薄切片(1微米),得到用Leica ULTRACUT UCT和甲苯胺藍染色(A)或用于免疫熒光研究(B)。
*薄切片(80納米)也獲得并用醋酸鈾1%和重組植酸酶的免疫定位后檸檬酸鉛3%的徠卡EM AC20。 光線和免疫熒光照片拍攝用Leica DM5500。 *薄切片進行觀察與飛利浦EM-400型電子顯微鏡。
看到不同的蛋白質的細胞器存儲在一個中間發展階段胚乳細胞:蛋白質貯藏液泡(箭頭)和玉米醇溶蛋白體(箭頭)。 以及周圍的玉米醇溶蛋白體(C,ZB),肌醇六磷酸酶在蛋白貯藏液泡(C,PSV,箭頭B,箭頭)意外地析出。 淀粉(S)。 酒吧10微米(A,B),1微米(C)。