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奧林巴斯顯微鏡的照明

2020-09-03 14:57:16

所有的頻繁,復雜和裝備精良的顯微鏡無法產生良好的圖像,由于不正確使用光源,這通常會導致樣品照明不足。優化時,試樣的照明應該明亮,無眩光,均勻地分散在視場。

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有眾多的光源可照亮顯微鏡,常規觀測和關鍵的顯微攝影。甲*常見的光源,由于其成本低,壽命長,是50或100瓦鎢鹵素燈作為顯微鏡的原理圖在圖1中,示出在該基地還詳細說明了在一個典型的現代的透射光顯微鏡的光學路徑。在該圖中,鎢鹵素燈發出連續光譜的光集中在3200 K(設置在燈電壓為9伏時),然后將其通過臺下聚光前的集電極和場透鏡被反射到到樣品上。顯微鏡物鏡成像光線被捕獲,并通過目鏡或幾個相機端口到一個分光鏡整個顯微鏡的光學路徑中,被引導的照明和聚焦照射試樣,然后進入目鏡或相機附件,因為它從源移動通過一系列的光闌及透鏡。對應的顯微鏡,以優化在現代顯微鏡的照明光學元件進行科勒照明的規則討論了如何發送和反射光顯微鏡對準適當的科勒照明更多細節在我們的路段上設置了一個顯微鏡透射光反射光上述圖1所示是典型的透射光顯微鏡的光學通路,并涉及了一些鏡頭,隔膜,鏡,分光鏡,直接通過顯微鏡的光。

鹵鎢燈相對明亮的顏色頻譜集中在3200 K(當設置在約9伏),但需要色彩轉換過濾器,以提高他們的色溫,白天等效。另一種流行的光源是75到150瓦氙燈,因為它的非常高的亮度和長壽命的,相對均勻的輸出在整個可見光譜,色溫接近日光膠片的乳劑所要求的。在非常高的光強度是必需的,錫鹵化物燈被經常使用。熒光顯微鏡中,通常采用特別關鍵的顯微攝影,100瓦,200瓦的汞的燃燒器的目的。前幾年,碳弧燈或鋯燈泡可能已被使用,但這些來源的今天很少見到。欲了解更多信息,并詳細討論了廣泛的顯微鏡照明燈,請訪問我們的部分光源顯微鏡和顯微攝影。

對準的光源照明通過光學通路在反射光顯微鏡的首要關心的問題,特別是就金相,半導體晶片檢查,并在熒光顯微鏡顯著的新進展。反射光也照亮顯微鏡具有多種光源(如上所述),可以進行調整以獲得*佳性能,使用科勒照明。這在我們的部分上配置科勒照明反射光顯微鏡中更詳細地討論

在他的*著作“ 通過顯微鏡攝影 “,約翰·德伊認為,80%和90%之間的所有提交的競賽,展覽和科學出版物的顯微照片是正確對齊的光學導致貧困樣品照明的受害者。這是一個*常見的問題,一般的顯微鏡和顯微攝影的一個驚喜,許多大學實驗室的學生顯微鏡檢查,就會發現大量的臺下聚光鏡調整不良的照明光源。我們懷疑,不正確的校準和調節臺下聚光和視場光闌,在整個范圍內的物鏡,在一個給定的顯微鏡,顯微攝影中的錯誤的*大來源。

提供適當照明的必要性怎么強調都不過分。過于頻繁,減少25000美元的顯微鏡水平的手持放大鏡照明和校準不當,導致*過2000美元顯微鏡科勒照明的*佳工藝條件下所采取的顯微照片

遠焦或非焦點照明 -不形成圖像的光源的照明系統,在一些點在光學路徑被稱為遠焦或非焦點照明。前發明的電燈泡,顯微鏡,他們在選擇合適的來源有限顯微鏡照明。在白天,他們可以指出他們的顯微鏡(或臺下反射鏡)向天空,并使用云原油擴散屏幕蔓延在整個視野照明均勻。儀器制造商還的接地反射鏡,以產生凹狀的反射面,努力提高在物體面的光強度。云彩和藍天本身容易成像的顯微鏡的光學路徑內的光源,因此遠焦照明源。室內和夜間的工作被迫依靠人工光源照明,由于固有的這些來源所產生的色溫較低,呈現自然日光下觀察試樣顏色在不同強度,不同的色調和色調比早期的顯微鏡。為了彌補這一點,使用的顯微鏡藍色的過濾器的不同類型的人造光的色溫的改變的表觀密切匹配的自然光。然而,如果沒有形成圖像的光源的光路內的某個地方,這些不同的照明方法早期仍然落入類別的遠焦或非焦點照明。

早期的調查顯示,日光和人工光源之間旋轉時,有(實際上)沒有明顯的變化在光學字符或圖像的分辨能力,提供回物鏡鏡頭完全充滿光明。后來,科學家們發現,*重要的要求是至少等于物鏡的數值孔徑的照明。在十九世紀,新的照明光源的開發,并集中了新的“源”(后來被稱為關鍵或Nelsonian照明)方法的開發,以提高顯微鏡照明條件。

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關鍵(或Nelsonian)顯微鏡照明照明 -此方法*早是由英國顯微鏡愛德華尼爾森使用光學原理由恩斯特阿貝*。Nelsonian照明非常成功的,直到十九世紀后期到20世紀的顯微鏡。今天,仍然有一些臨界照明的倡導者繼續使用它需要外部光源,或更便宜的學生顯微鏡,顯微攝影是不是一個問題的顯微鏡。

nelsonian的照度依賴于使用臺下聚光器,以產生一個聚焦的圖像中的火焰從燃燒油的燈(或其它光源均勻)的試樣的平面的,以實現在整個視場的一個比較均勻的照明條件。時,考慮這種方法的照明光源均勻性是重要的方面。由燃燒產生的火焰燈是相當均勻和一致,但也可以用于其它的信息源,例如磨砂放大機燈泡,燈泡蛋白石,或色帶長絲臨界照明。圖2示出臨界照明的光學路徑使用一個假設的油提供了一個均勻的照明源的燈。

從油燈火焰發射的光必須聚焦在試樣平面上面的載玻片臺下聚光器(參見圖2),使所產生的火焰的圖像。在實踐中,通常是困難或不可能找到在火焰的中心部分的焦點,所以通常是集中與隨后臺下鏡調整的火焰的“邊緣”,使圖像的中心部分的火焰填充的視場。(如果存在的話)通常是在外部安裝的視場光闌,可以控制進入顯微鏡的光的量。足夠的光線必須輸入的顯微鏡完全填補回平面的客觀,這可以通過適當的調整聚光鏡光圈控制。對焦樣品中的平面光源是不穩定的,并且常常可以產生粒狀,不均勻,或有斑點的背景。這是可以克服的,稍微散焦臺下聚光產生更均勻的背景。Nelsonian照明已經在很大程度上被取代顯微鏡的照明方法更為高效克勒。

科勒照明 -此主題的引物在另一部分中更詳細地討論,但我們將簡要地在這里涉及的主要方面。科勒照明的光源,圖像被聚焦在聚光鏡的孔徑光闌,通過檢體或對象的平面的平行光而散。聚光鏡下方的光源(孔徑光闌)的放大的圖像會產生很寬的光錐的試樣所需要的*佳分辨率可用于聚光鏡孔徑光闌的大小來控制,照在樣品上的光錐的數值孔徑,并減少不必要的雜散光和眩光。此外,在聚光鏡上的玻璃表面的灰塵和其他缺陷的成像*小化。

是非常有效的樣品照明取決于適當對準所有的光學組件,包括在顯微鏡的照明源。嚴重的顯微鏡應該成為熟悉各組分的調整范圍,并應該練習對準這些不同的樣品和物鏡。光照不均勻顯微質量產生嚴重的影響,造成的“熱點”,暈影,色彩條紋,對比度差,以及各種其它不良影響。都配備了一些*新的顯微鏡“預為中心”的燈不允許調整的,有的甚至供給聚光鏡,沒有橫向調整機制。重要的是要確保這些顯微鏡對準適當的科勒照明在出廠前,從事顯微攝影。顯微鏡仔細閱讀說明書和/或質疑你的工廠有關的重要細節進行了優化,這些顯微鏡照明技術代表。



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