尼康顯微鏡的CCD分辨率
CCD的*終分辨率的光電二極管的數量和它們的大小,相對于由光學顯微鏡投射到芯片的表面上的圖像的功能。 當試圖匹配顯微鏡光學拆分到特定的數字攝像頭,使用該計算器,以確定所需的像素密度,以充分從顯微鏡捕獲的所有數據。
操作教程,首先選擇感興趣的使用物鏡下拉菜單客觀的光學像差校正系數。 下一步,選擇從放大的下拉菜單中選擇放大倍數/數值孔徑的組合。 之后這些選擇是由,像素計算器將自動進行必要的計算,以在對CCD攝像機的像素所需數量的到達。 這個值將被顯示在粉紅色的數據中,在教程窗口的底部標有*低要求的像素(百萬)。 在計算中所用的其它重要參數的中間值被顯示在位于下拉菜單和粉紅色數據框之間的藍灰色的數據框。
只能實現成像的尼康顯微鏡的光學元件的檢體的足夠的分辨率,如果至少兩個樣本的每個分辨單元作出的,雖然許多研究者傾向于每解析單元3的樣品,以保證有足夠的采樣。 在衍射受限的光學儀器,如顯微鏡中,在550納米的平均波長的光學分辨率的阿貝極限是0.22微米,使用具有1.4的數值孔徑的物鏡時。 在這種情況下,11×11微米的傳感器尺寸都只是足夠大,以允許要被匹配的光學和電子的分辨率,具有7×7微米的傳感器尺寸優選的。 雖然在一個CCD的小型傳感器提高了空間分辨率,還限制了裝置的動態范圍。
下面的計算中,基于對580納米的平均照射波長,被用于制造這種交互式Flash教程。 顯微鏡物鏡被假定為具有40倍的放大系數在0.95(計劃復消色差的優質干物鏡)的數值孔徑值。
光學分辨率(R)=λ/(NA(物鏡)+ NA(聚光鏡))
在物鏡和聚光器的數值孔徑相匹配,并等于0.95的值,并且使用580納米(0.58微米)的平均波長的值的系統,該溶液變為:
光學分辨率(R)= 0.58 /(0.95 + 0.95)= 0.305 um
圖像尺寸投射到CCD檢測器的表面等于所述光學分辨率乘以物鏡的放大倍率:
CCD圖像尺寸 =光學分辨率(R)×總倍率(M)
在這些計算中所使用的物鏡,是一個40倍的平場復消色差透鏡具有0.95的數值孔徑。 因此,圖像尺寸投射到CCD表面是:
CCD圖像尺寸= 0.305×40 = 12.21 um=0.01221 mm
要轉換的圖像尺寸投射到CCD表面(0.01221毫米)為每毫米的線對,我們把投影尺寸的倒數:
線對/毫米= 1/CCD圖像尺寸 = 81.90
每毫米的線對可以通過垂直CCD尺寸乘以這個量(在此情況下,6.4毫米),次系數2被轉換成等效的電視線:
電視線= LP /毫米×垂直CCD尺寸×2 = 81.90 X 6.4 X 2 = 1048.3
CCD的*大分辨率,現在可以通過由CCD縱橫比(5/4或1.25對于這個例子)相乘的電視線的數目來計算。
CCD*大分辨率=電視線X長寬比= 1048.3×1.25 = 1310.3
*后,需要匹配的顯微鏡裝置的光學分辨率的像素的*小數目可通過乘以電視線倍CCD的*大分辨率的數目來計算。
*低像素要求=電視線X CCD*大分辨率= 1400000
從系列以上進行,一個40倍的平場復消色差物鏡具有0.95的數值孔徑和580納米的波長照射,有必要從顯微鏡獲得*大的光數據的像素數操作的計算是140萬。 此值屬于符合目前的顯微鏡制造商或售后插件提供了許多數碼相機的分辨能力。