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徠卡顯微鏡FRET與FLIM定量在體內生物化學
熒光壽命是多久熒光團保留在平均在激發態通過發射熒光光子返回到基態之前的量度。它依賴于熒光團的分子的組合物和納米環境。FLIM結合壽命測量與成像：為每個圖像像素獲得的壽命是顏色編碼，以產生更多的圖像對比度。因此，FLIM有關其生化狀態或納米環境的信息提供關于熒光分子的空間分布的信息一起。FLIM的一個典型應用是FLIM-FRET。FRET是一個行之有效的方法來研究分子間的相互作用。它審視蛋白結合，并
2020-09-04
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![熒光共振能量轉移（FRET）]()
熒光共振能量轉移（FRET）
活細胞研究遇到的問題： 蛋白質或其他分子在活細胞內互相結合的時間和地點是了解它們功能的關鍵問題。要回答這一問題，需將蛋白質標上不同的熒光團。但是，光學顯微鏡的分辨率將蛋白質檢測精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方法，在供體和受體相互靠得很近（1-10 nm）時，將光子能從一個受激發的熒光團（供體）轉移到另一個熒
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：熒光激發塊的分類]()
尼康顯微鏡：熒光激發塊的分類
落射熒光的干擾和吸收濾色鏡組合被安置在濾色鏡立方體（或光學塊），并包括激發濾光片，二色性分束器（通常稱為反光鏡），和光柵（或發射）的濾色鏡，如在圖1中示出（一）。使用本指南中選擇適當的濾色鏡設置為廣角熒光顯微鏡調查所用的發色團的激發和發射光譜特性相匹配。作為一個例子，圖1（b）給出一個典型的高性能帶通發射藍光激發濾色鏡組合的光譜。尼康熒光濾光器組合中所提供窄，中，寬的通帶激發版本與相應的發射濾色鏡
2020-09-04
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![徠卡顯微鏡：全內反射熒光顯微鏡（TIRF）]()
徠卡顯微鏡：全內反射熒光顯微鏡（TIRF）
全內反射熒光（TIRF）是一種特殊的技術，在20世紀80年代初在安阿伯市密歇根大學的丹尼爾·阿克塞爾羅德在熒光顯微鏡。全內反射熒光顯微鏡提供的圖像具有出色的高軸向分辨率低于100納米。這允許與膜相關的過程的觀察。 全內反射熒光顯微鏡它允許靠近的玻璃/水（或玻璃/試樣）接口的熒光分子成像。這是通過采用的漸逝波通過交付的弧光燈，發光二極管（LED）或激光的光激發的熒光基團，而不是直接照明。如果入射的光
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數]()
尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數
迄今發現的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當廣泛，并已成功地應用在幾乎每一個生物學科從微生物系統生理學。這些獨特的探頭已經證明是非常有用的記者在培養細胞和整個動物的基因表達研究。熒光蛋白在活細胞中，最常用的跟蹤本地化和動態的蛋白質，細胞器，和其他細胞區室，以及細胞內蛋白質運輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術，其中包括寬視場，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細胞結構和功能的復雜性，提供了一個
2020-09-04
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![徠卡顯微鏡：螢光蛋白及熒光計時器]()
徠卡顯微鏡：螢光蛋白及熒光計時器
術語“螢光蛋白”結合了一組基因改變的熒光蛋白，具有非常特殊的屬性：它們可以從一個非熒光狀態激活，他們可以改變他們的發射光譜或進行切換和關閉，他們甚至能夠“為很多次。此行為是由于一些獨特的照片的物理屬性。在單分子水平，許多熒光蛋白顯示閃爍的活動可以由外部照明的影響的特性。有明顯分別發射和非發射新的發射狀態，所表達的內容屬性光可活化，photoconvertible的的或光開關，光學熒光筆蛋白突變的熒
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：維持活細胞顯微鏡載物臺上]()
尼康顯微鏡：維持活細胞顯微鏡載物臺上
越來越多的調查，使用活細胞成像技術的基本性質，細胞和組織的功能，特別是由于目前正在目睹熒光蛋白合成熒光技術的快速進步提供重要的洞察。由于這些進步，活細胞成像已經成為必要的分析工具，在大多數細胞生物學實驗室，以及一個常規的方法，在廣泛領域的神經生物學，發育生物學，藥理學，和許多其他相關的生物醫學研究的學科實line。其中最重要的技術挑戰進line成功的活細胞成像實驗是細胞維持在一個健康的狀態，并合成
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數]()
尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數
迄今發現的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當廣泛，并已成功地應用在幾乎每一個生物學科從微生物系統生理學。這些獨特的探頭已經證明是非常有用的記者在培養細胞和整個動物的基因表達研究。熒光蛋白在活細胞中，最常用的跟蹤本地化和動態的蛋白質，細胞器，和其他細胞區室，以及細胞內蛋白質運輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術，其中包括尼康顯微鏡，寬視場，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細胞結構和功能的復雜性
2020-09-03
