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尼康顯微鏡:活細胞成像對光學系統和CCD的要求
在活細胞研究設計的光學顯微鏡系統,主要考慮檢測器的靈敏度(信號與噪聲),圖像采集所需要的速度,以及標本的可行性。相對較高的光照強度和較長的曝光時間,通常采用固定的細胞和組織(如漂白是主要的考慮因素)中記錄圖像時,必須嚴格避免與活細胞。在幾乎所有的情況下,活細胞顯微代表了一種妥協之間實現最佳的圖像質量和保持健康的細胞。不必要的過采樣的時間點,使細胞含量超標的照明,空間分辨率和時間分辨率的實驗,而不是
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:熒光的基本概念
熒光是敏感,其中創建的物理(例如,光的吸收),機械(摩擦),或化學機制從電子激發態的分子發光的無處不在的發光過程家族的成員。通過由紫外線或可見光的光子的分子的激發發光發電的是這樣一種現象稱為光致發光,正式分為兩大類,熒光和磷光,這取決于激發態的電子組態和排放路徑。熒光是一些原子和分子的屬性,在一個特定的波長吸收光,并隨后經過短暫的時間間隔更長的波長的光發射被稱為熒光壽命。發生的方法的磷光熒光的方式
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光激發塊的分類
落射熒光的干擾和吸收濾色鏡組合被安置在濾色鏡立方體(或光學塊),并包括激發濾光片,二色性分束器(通常稱為反光鏡),和光柵(或發射)的濾色鏡,如在圖1中示出(一)。使用本指南中選擇適當的濾色鏡設置為廣角熒光顯微鏡調查所用的發色團的激發和發射光譜特性相匹配。作為一個例子,圖1(b)給出一個典型的高性能帶通發射藍光激發濾色鏡組合的光譜。尼康熒光濾光器組合中所提供窄,中,寬的通帶激發版本與相應的發射濾色鏡
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光顯微鏡的結構
由有機和無機樣品的光的吸收,隨后再輻射通常是既定的物理現象作為熒光或磷光的結果。通過光的發射熒光過程幾乎是同時地吸收的激發光的光子的吸收和發射,取值范圍通常小于一微秒的持續時間相對較短的時間之間的延遲。當發射仍然存在更長的時間后已經熄滅的激發光,該現象被稱為磷光。首先描述英國科學家喬治爵士G.斯托克斯于1852年,是負責這一術語時,他觀察到的礦物螢石發出紅光,當它被照亮的紫外線激發熒光。斯托克斯指
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:熒光激發和發射基本面概述
由于其新穎的電子配置,熒光染料有獨特的特征吸收光譜(通常是類似的激發)和發射。這些吸收光譜和發射光譜表明相對強度的熒光,與經典的相對強度與波長在橫軸上繪制在垂直軸。對于一個給定的熒光染料,制造商指示的照明激發光強度和熒光的發光強度的峰值波長為峰值波長。重要的是要了解顯示對于一個給定的熒光染料的激發和發射光譜的圖表和曲線的原點。為了確定一個特定的熒光染料的最大吸收波長(通常是相同的激發最大值)的發射
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光蛋白的成像參數
迄今發現的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當廣泛,并已成功地應用在幾乎每一個生物學科從微生物系統生理學。這些獨特的探頭已經證明是非常有用的記者在培養細胞和整個動物的基因表達研究。熒光蛋白在活細胞中,最常用的跟蹤本地化和動態的蛋白質,細胞器,和其他細胞區室,以及細胞內蛋白質運輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術,其中包括寬視場,共聚焦和多光子顯微鏡,熒光蛋白的定量成像曝光細胞結構和功能的復雜性,提供了一個
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光蛋白的成像參數
迄今發現的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當廣泛,并已成功地應用在幾乎每一個生物學科從微生物系統生理學。這些獨特的探頭已經證明是非常有用的記者在培養細胞和整個動物的基因表達研究。熒光蛋白在活細胞中,最常用的跟蹤本地化和動態的蛋白質,細胞器,和其他細胞區室,以及細胞內蛋白質運輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術,其中包括尼康顯微鏡,寬視場,共聚焦和多光子顯微鏡,熒光蛋白的定量成像曝光細胞結構和功能的復雜性
2020-09-03
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奧林巴斯顯微鏡:光學熒光筆熒光蛋白
熒光蛋白的發現和后續優化中的遺傳性質的這些顯著的探針來生成各種各樣的發射帶寬配置已擴展生物學家在活細胞中具有高時空分辨率的可視化,跟蹤和量化分子事件的能力。熒光蛋白可以融合到幾乎任何感興趣的蛋白質或酶,礁珊瑚,水母和海葵物種的各種來自以分析在活細胞中蛋白質地理,運動,血統,和生物化學。在此方面,這些生物探針提供了一個重要的新的方法來了解蛋白質的功能,這是一個合乎邏輯的步驟細胞過程的調查,現在許多生
2020-09-03