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尼康顯微鏡:在光學顯微鏡的衍射障礙
光學顯微鏡發揮了核心作用,幫助理清復雜的生物學奧秘自從十七世紀荷蘭發明家安東尼凡列文虎克,英國科學家羅伯特·胡克首先報道分別使用單鏡頭及復合顯微鏡,觀察。在過去的三個世紀中,廣大的技術開發和制造的突破導致了顯著的先進的顯微鏡設計,極大地提高了圖像質量,以最小的像差。然而,盡管計算機輔助光學設計和自動化磨削方法用來制造現代的鏡頭組件,基于玻璃顯微鏡仍然阻礙征收可見光的波陣面的衍射光學分辨率極限,因為
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:物鏡的數值孔徑和分辨率
顯微鏡物鏡的數值孔徑是其收集光并解決細標本細節在一個固定的物體距離的能力的量度。圖象形成光波穿過試樣和在倒置錐體進入物鏡,如圖1這個錐形光的縱向切片顯示了孔徑角,是由物鏡的焦距確定的值。角μ是二分之一的數值孔徑角(A),它與通過以下等式的數值孔徑:數值孔徑 (NA) = n(sin μ)其中n是物鏡的前透鏡和試樣玻璃蓋,一個值,該范圍為1.00空氣1.51專門浸沒油之間的成像介質的折射率。許多作者
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡的熒光共振能量轉移(FRET)
初級概念特定分子種類之間的相互作用的活細胞中的精確位置和性質是在生物學研究的許多領域主要關心的,但是調查經常被用來研究這些現象的文書的分辨率有限的阻礙。 常規寬視場熒光顯微鏡使在由瑞利判據,約200納米(0.2微米)所定義的光空間分辨率極限本地化熒光標記的分子。 然而,為了理解所涉及的典型的生物分子的過程蛋白伙伴之間的物理相互作用,分子的相對接近度,必須更精確地確定比衍射限制的
2020-09-04
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人眼能分辨的東西有多大?
人眼能分辨的東西有多大??? 對于人眼的分辨極限也必須滿足瑞利判據: ? ? ? ? ? ? ? ? △Q=1.22λDD---人眼的瞳孔直徑(2mm~9mm,取中間值5mm);λ---波長,人眼最敏感的綠光約為5500nm△Q---人眼的視角(約為1')最小分辨距離△y=25△Q≈0.1mm(人眼的明視距離約為25cm)??當人眼看不清楚的,需要用顯微鏡觀察,該如何選擇顯微鏡,我們要看(研究)
2020-09-04
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尼康顯微鏡:活細胞成像對光學系統和CCD的要求
在活細胞研究設計的光學顯微鏡系統,主要考慮檢測器的靈敏度(信號與噪聲),圖像采集所需要的速度,以及標本的可行性。相對較高的光照強度和較長的曝光時間,通常采用固定的細胞和組織(如漂白是主要的考慮因素)中記錄圖像時,必須嚴格避免與活細胞。在幾乎所有的情況下,活細胞顯微代表了一種妥協之間實現最佳的圖像質量和保持健康的細胞。不必要的過采樣的時間點,使細胞含量超標的照明,空間分辨率和時間分辨率的實驗,而不是
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡,標準分辨率和性能問題
分辨率在光學顯微鏡通常由光學單元稱為瑞利判據,它最初是制定確定的二維望遠鏡的圖像分辨率的方法進行評估,但已蔓延到在光學許多其他領域。瑞利準則是在光從樣本生成的,并且是不依賴于用于產生所述圖像的放大率兩個點源之間的最小可分辨的距離來定義。 在一個二維圖像,兩個點源是可解析的,如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據瑞利準則,兩個緊密間隔的艾里磁盤是不同的,如果他們是距離大于在其中的一個艾里斑的主
2020-09-03
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奧林巴斯顯微鏡,標準分辨率和性能問題
分辨率在光學顯微鏡通常由光學單元稱為瑞利判據,它最初是制定確定的二維望遠鏡的圖像分辨率的方法進行評估,但已蔓延到在光學許多其他領域。瑞利準則是在光從樣本生成的,并且是不依賴于用于產生所述圖像的放大率兩個點源之間的最小可分辨的距離來定義。 在一個二維圖像,兩個點源是可解析的,如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據瑞利準則,兩個緊密間隔的艾里磁盤是不同的,如果他們是距離大于在其中的一個艾里斑的主
2020-09-03
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尼康顯微鏡:活細胞成像的光學系統和探測器的要求
在活細胞的調查設計的光學顯微系統時,主要考慮因素是檢測器的靈敏度(信號 - 噪聲),所需要的圖像采集速度,和標本的可行性。相對較高的光強度和較長的曝光時間,通常采用在記錄圖像固定的細胞和組織(如漂白為主要考慮因素),必須嚴格避免工作時,與活細胞。在幾乎所有的情況下,活細胞顯微鏡代表實現最佳的圖像質量,并保持健康的細胞之間的一種折衷。不必要的采樣時間點,使細胞過度的照明水平,而不是實驗設置的時空分辨
2020-09-03