-
奧林巴斯顯微鏡,標準分辨率和性能問題
分辨率在光學顯微鏡通常由光學單元稱為瑞利判據,它最初是制定確定的二維望遠鏡的圖像分辨率的方法進行評估,但已蔓延到在光學許多其他領域。瑞利準則是在光從樣本生成的,并且是不依賴于用于產生所述圖像的放大率兩個點源之間的最小可分辨的距離來定義。 在一個二維圖像,兩個點源是可解析的,如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據瑞利準則,兩個緊密間隔的艾里磁盤是不同的,如果他們是距離大于在其中的一個艾里斑的主
2020-09-03
-
尼康顯微鏡物鏡的數值孔徑
?數值孔徑?(也稱為物方孔徑?)是一個值(通常縮寫為NA象征)最初是由阿貝的顯微鏡物鏡和聚光鏡定義。?它由下式給出了簡單的表達式:數值孔徑(NA) = n × sin(μ) or n × sin(α)注意:許多作者使用變量μ來指定一個半孔徑角,而其他使用更常見的術語α,并且在某些情況下,θ。在數值孔徑方程中,n表示物鏡前透鏡與試樣之間的介質的折射率,μ,α是物鏡的半孔徑角。顯微鏡物鏡的數值孔徑,其
2020-09-03
-
尼康顯微鏡,有效的放大倍率
?以觀察細標本細節在光學顯微鏡下,存在的微小的功能必須有足夠的對比度和投影中間圖像間的角度是稍微大于人眼的角度分辨能力大。?在選定的數值孔徑,在顯微鏡提供的放大圖像,其具有大小等于人眼的分辨率極限,超過該點附加放大率不會導致甚至更小的樣品細節的分辨率。有效的倍率為物鏡/目鏡組合的范圍是由顯微鏡光學系統的數值孔徑來定義。?有得到解決必要的細節的最小放大率存在的圖像,并且該值通常相當任意設置為500倍
2020-09-03
-
尼康顯微鏡的圖像亮度
不論在光學顯微鏡中使用的成像模式的,圖像的亮度是由物鏡,即數值孔徑的函數的聚光功率管。 正如照明亮度被聚光的工作數值孔徑的平方確定,試樣圖像的亮度正比于物鏡的數值孔徑的平方。不像在顯微鏡的照明系統的情況,但是,圖像的放大倍率也起著決定圖像亮度的重要作用。事實上,圖像亮度是成反比的橫向放大率的平方:圖像亮度∝ (NA/M)2其中,NA是物鏡的數值孔徑,M為放大倍數。 公式中給出的比例高于表達了透的
2020-09-03
-
尼康顯微鏡物鏡的景深和焦深
?當考慮到在光學顯微鏡的分辨率,大部分的重點放在上的點至點在垂直于光軸的橫向分辨率(圖1)。?向分辨率的另一個重要方面是在軸向(或縱向)拆分的物鏡,即測量平行于光軸,并且最經常被稱為景深的分辨能力。軸向分辨率,如水平分辨率,僅通過物鏡的數值孔徑(圖2)決定的,與目鏡僅僅放大鏡解決,投影到中間像平面的細節。?正如在傳統的攝影,景深是通過從在焦點最近的物體面到最遠的平面也同時在焦點的距離來確定。?在現
2020-09-03
-
尼康顯微鏡:熒光蛋白的成像參數
迄今發現的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當廣泛,并已成功地應用在幾乎每一個生物學科從微生物系統生理學。這些獨特的探頭已經證明是非常有用的記者在培養細胞和整個動物的基因表達研究。熒光蛋白在活細胞中,最常用的跟蹤本地化和動態的蛋白質,細胞器,和其他細胞區室,以及細胞內蛋白質運輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術,其中包括尼康顯微鏡,寬視場,共聚焦和多光子顯微鏡,熒光蛋白的定量成像曝光細胞結構和功能的復雜性
2020-09-03
-
尼康顯微鏡:反射(落射)光照明
也許最關鍵的環節,這適用于所有形式的光學顯微鏡觀察標本的照明和感興趣的特點,揭示其有效性的方法。往往利用體視顯微鏡下檢查標本反映(落射)和透射(透射)照明計劃,采用多種光源和配置在適當的位置,這是戰略定位。在很多情況下,反射和透射的光源相結合,以利用特定試樣的特性,更有效地揭示了感興趣的特征的方式。這次審查的重點各種各樣的技術和設備,目前在使用中,照亮了眾多的標本觀察反射光技術。許多用體視顯微鏡標
2020-09-03
-
奧林巴斯顯微鏡:熒光顯微鏡攝影的錯誤
顯微攝影在熒光照明條件下,提出了一套獨特冒充顯微鏡的特殊問題的情況。曝光時間往往是非常長的(在某些情況下運行多少秒到幾分鐘),試樣的熒光可能會在曝光過程中褪色,全黑的背景往往在不經意間光信號米建議過度曝光。此外,熒光的標本發出他們自己的光,和顆粒位于所需的焦點平面的上方和下方往往輻射光造成圖像細節模糊。盡管熒光圖像可能會顯得明亮時,通過顯微鏡目鏡(由于人眼對光線的敏感度的精致),它們通常需要較長的
2020-09-03